Наибольшее значение в патологии человека имеют грамположительны кокки родов Peptococcus (P.niger) и Peptostreptococcus (P.anaerobius, P.asaccharolyticus, P.micros). Прочие анаэробные грамположительные кокки значения не имеют.
Распространенность и устойчивость в окружающей среде. Пептококки и пептострептококки являются частью анаэробной микрофлоры различных биотопов организма человека (слизистых оболочек). При попадании в кислородные условия мгновенно погибают. Чувствительны к действию антисептиков, дезинфектантов и антибактериальных препаратов (пенициллины, левомицетин, метронидазол и др.).
Род Peptococcus
Морфологические и тинкториальные свойства. В мазках, окрашенных по Граму пептококки выглядят также как стафилококки — неправильные группы грамположительных кокков, напоминающие гроздья винограда; неподвижны, спор, капсул не образуют. Типовой (единственный) вид Peptococcus niger.
Культуральные свойства. Строгие анаэробы, нуждаются в обогащенных питательных средах (5% кровяной Шедлер агар и др.). На кровяном агаре в анаэробных условиях через 48 часов образуют мелкие, выпуклые, блестящие, полупрозрачные или мутные колонии черного цвета. Температурный оптимум роста 37°С.
Антигенные свойства. Изучены недостаточно. Антигенными свойствами обладают пептидогликан и тейхоевые кислоты клеточной стенки.
Биохимические свойства. Инертны по отношению к углеводам, энергию получают расщеплением пептонов. Обычно каталаза-отрицательны, не восстанавливают нитраты, не образуют индол.
Медицинское значение. Вызывают гнойно-воспалительные заболевания различных биотопов организма человека, чаще всего в ассоциации с другими условно-патогенными микроорганизмами. Эти заболевания носят эндогенный характер.
Факторы патогенности. Изучены недостаточно, связаны со способностью к адгезии (адгезины), продукцией гиалуронидазы и коллагеназы.
Микробиологическая диагностика. Основные методы бактериоскопический и бактериологический (см. схему).
Лечение. Использование антибактериальной химиотерапии .
Профилактика. Укрепление местного и общего иммунитета.
Род Peptostreptococcus
Морфологические и тинкториальные свойства. Представлены неподвижными грамположительными кокками или коккобациллами, образующими короткие цепочки. Способны образовывать капсулу. Спор не образуют. Типовой вид Peptostreptococcus anaerobius.
Культуральные свойства. Строгие анаэробы, нуждаются в обогащенных питательных средах (5% кровяной Шедлер агар и др.). На кровяном агаре в анаэробных условиях через 48 часов образуют мелкие, выпуклые, блестящие, полупрозрачные или мутные колонии с зоной α-гемолиза или без него. Температурный оптимум роста 37°С. Колонии P.anaerobius имеют характерный сладковатый запах, бактерии чувствительны к анетолсульфонату натрия, что используется для их дифференциации с помощью дисков.
Антигенные свойства. Изучены недостаточно. Антигенными свойствами обладают пептидогликан и тейхоевые кислоты клеточной стенки.
Биохимические свойства. Хемоорганотрофы, некоторые виды способны ферментировать углеводы, восстанавливать нитраты и образовывать индол. Обычно каталаза-отрицательны.
Медицинское значение. Вызывают гнойно-воспалительные заболевания различных биотопов организма человека (челюстно-лицевой области, кишечника, легких, матки и др.), чаще всего в ассоциации с другими условно-патогенными микроорганизмами. Эти заболевания носят эндогенный характер.
Факторы патогенности. Изучены недостаточно, связаны со способностью к адгезии (адгезины и наличие капсулы), продукцией гемолизинов, гиалуронидазы и коллагеназы.
Микробиологическая диагностика. Основные методы бактериоскопический и бактериологический (см. схему).
Лечение. Использование антибактериальной химиотерапии (препараты выбора — клиндамицин, левомицетин, имипенем и метронидазол).
Профилактика. Укрепление местного и общего иммунитета.
Грамотрицательные анаэробные кокки
Наибольшее значение в патологии человека имеют анаэробные грамотрицательные кокки рода Veillonella.
Род Veillonella
Распространенность и устойчивость в окружающей среде. Бактерии являются частью анаэробной микрофлоры слизистых оболочек полости рта, носоглотки и кишечника. При попадании в кислородные условия мгновенно погибают. Чувствительны к действию антисептиков, дезинфектантов и антибактериальных препаратов (клиндамицину и метронидазолу).
Морфологические и тинкториальные свойства. Неподвижные грамотрицательные кокки диаметром 0,3-0,5 мкм. В мазках располагаются парами, беспорядочными скоплениями или короткими цепочками. Типовой вид — Veillonella parvula.
Культуральные свойства. Строгие анаэробы. Оптимальная температура роста 30-37°С, оптимум рН 6,5-8,0. На молочном агаре образуют звездчатые блестящие колонии диаметром 1-3 мм.
Антигенные свойства. Изучены недостаточно, связаны с липополисахаридом клеточной стенки.
Биохимические свойства. Хемоорганотрофы; расщепляют пируват, лактат, малат, фумарат, оксалоацетат. Каталазоотрицательны, не гидролизуют желатин, не сворачивают молоко, не образуют индол, восстанавливают нитраты в нитриты. При ферментации лактата образуют ацетат, пропионат, углекислый газ и водород.
Медицинское значение. Вызывают гнойно-воспалительные заболевания челюстно-лицевой области, носоглотки, кишечника только в ассоциации с другими условно-патогенными микроорганизмами.
Факторы патогенности. Изучены недостаточно, возможно, патогенность обусловлена наличием эндотоксина.
Микробиологическая диагностика. Основные методы бактериоскопический и бактериологический (см. схему).
Лечение. Использование антибактериальной химиотерапии (препараты выбора — клиндамицин, левомицетин, имипенем и метронидазол).
Профилактика. Укрепление местного и общего иммунитета.
Лечение. Использование антибактериальной химиотерапии (препараты выбора — клиндамицин и метронидазол).
Профилактика. Укрепление местного и общего иммунитета.
cyberpedia.su
Семейство Micrococcaceae
Клетки сферические, 0,5-3,5 мкм в диаметре. Для них характерно деление более чем в одной плоскости с образованием правильных или неправильных пакетов или групп. Грамположительны. Хемоорганотрофы. Факультативные анаэробы, и с глюкозы, в случае ее расщепления, образуется кислота без газа. Все штаммы растут в присутствии 5, а многие 10-15% NaCl. Каталазоположительные.
Род Micrococcus
Клетки сферические, 0,5-3,5 мкм в диаметре. Встречаются в парах, поодиночке, а также могут образовывать неправильные скопления, тетрады или кубические пакеты. Неподвижны. Спор не образуют. Грамположительны. Аэробы. Хемоорганотрофы. Используют углеводы, пируват, ацетат, лактат, глутамат. Глюкоза окисляется до уксусной кислоты или до СО2 и воды. Индол не образуют. Каталазоположительные, слабооксидазоположительные. Могут образовывать каротиноидные пигменты. Оптимальная температура роста 25-37°С. Все могут расти при концентрации 5% NaCl. Колонии на средах обычно желтые или красные.
Обычный обитатель почв и пресных вод. Часто встречается на коже человека и животных.
Род Staphylococcus
Клетки сферические, 0,5-1,5 мкм в диаметре. Встречаются поодиночке и в парах, а также образуют неправильные скопления. Неподвижны. Спор не образуют. Грамположительные. Факультативные анаэробы. Рост более обильный и быстрый в аэробных условиях. Температурный оптимум 35-40°С, оптимум рН 7,0-7,5. Большинство штаммов растут в присутствии 15% NaCl и 40% желчи. Хемоорганотрофы. В присутствии воздуха могут использовать многие углеводы с образованием кислоты. Арабинозу, целлобиозу, инозит, инулин или рафинозу не расщепляют. Крахмал и эскулин не гидролизуют. Каталазоположительные, оксидазоотрицательные. Гидролизуют белки и жиры. Индол не образуют. Восстанавливают нитраты до нитритов. Ацетоин образуют (реакция Фогес-Проскауэра положительная). Выделяют внеклеточные ферменты и токсины. Обычно чувствительны к антибиотикам: тетрациклину, хлорамфениколу, новобиоцину, но устойчивы к полимиксину и полиенам. Чувствительны к фенолу и его производным, галогенам. Умеренно устойчивы к гамма-облучению.
Распространены на кожной поверхности, в кожных железах, и слизистых оболочках теплокровных животных. Многие виды потенциально патогенны для человека и животных. Служат хозяевами для многих бактериофагов.
Род Planococcus
Сферические клетки, 1,0-1,2 мкм в диаметре. Встречаются поодиночке, в парах, по три или в тетрадах. Подвижны (моно- или лофотрихи). Спор не образуют. Грамположительные. Строгие аэробы. Хемоорганотрофы. На стандартных средах из углеводов кислоту или газ не образуют. Не образуют ацетилметилкарбинол, когаулазу, фосфатазу, не восстанавливают нитраты и нитриты. Желатин гидролизуют, каталазоположительные, оксидазоотрицательные, хороший рост в пределах 20-37°С. Колонии желто-оранжевые, плохо растут на средах с содержанием NaCl менее 1 и более 15%. Встречаются в морской воде.
Семейство Streptococcaceae
Клетки сферические или овальные, в парах или цепочках разной длины, или в тетрадах. Неподвижны. Спор не образуют. Грамположительны. Факультативные анаэробы. Хемоорганотрофы. Углеводы сбраживают с образованием кислот и газов или только кислот.
Род Streptococcus
Клетки - от сферических до овальных, менее 2 мкм в диаметре. Встречаются в парах или цепочках, грамположительные, у некоторых обнаруживается капсула, в основном, неподвижные. Хемоорганотрофы, факультативные анаэробы. Сбраживают лактозу с образованием молочной кислоты без газа. Некоторые виды сбраживают органические кислоты. Каталазоотрицательные. Температурный оптимум около 37°С. Патогенные формы лизируют эритроциты. Обитают в верхних дыхательных путях человека и животных. Некоторые виды патогенны для человека.
Род Leuconostoc
Клетки могут быть сферическими, но часто чечевицеобразные, особенно на агаре. Обычно в парах или цепочках. Неподвижные, грамположительные, спор не образуют. Факультативные анаэробы. Цитохромы отсутствуют. Каталазоотрицательные. Хемоорганотрофы, требующие богатых сред. Глюкозу сбраживают с образованием молочной кислоты, этанола и углекислого газа. Крахмал, глицерин, сорбит и инозит не сбраживают. Индол не образуют. Не восстанавливают нитраты. Негемолитические. Непротеолитические. рН 4,4-5,0. Растут медленно, образуя мелкие, иногда слизистые колонии на средах с сахарозой. Оптимальная температура 20-30°С. Распространены на растениях, в молочных и других пищевых продуктах.
Род Pediococcus
Кокки, встречаются в парах или тетрадах. Одиночные клетки или цепочки редки. Неподвижны. Спор не образуют. Грамположительные. Факультативные анаэробы. Каталазоотрицательные. Хемоорганотрофы. Глюкозу, фруктозу и маннозу сбраживают с образованием кислоты без газа. Сорбит и крахмал не сбраживают. Желатин не разжижают. Нитраты не восстанавливают. Оптимальная температура роста 25-45°С. Сапрофиты. Встречаются в бродящих растительных материалах, особенно в испорченном пиве, редко - в молоке и молочных продуктах.
Род Aerococcus
Сферические клетки, 1,0-2,0 мкм в диаметре с сильной тенденцией к образованию тетрад. Неподвижны. Грамположительные. Спор не образуют. Факультативные анаэробы. Каталазоотрицательные. Хемоорганотрофы. Сбраживают углеводы с образованием кислоты без газа. Желатин не разжижают. Нитраты не восстанавливают. Оптимальная температура роста 30°С, при 45°С не растут. На кровяном агаре наблюдается заметное позеленение, при рН 9,6 растут в присутствии 10% NaCl и 40% желчи.
Широко распространены в воздухе, мясных рассолах и на сырых обработанных овощах, возбуждают заболевания омаров.
Род Gemella
Клетки одиночные или в парах, где смежные стороны клеток уплощены. Грамвариабельны. Неподвижны. Спор не образуют. Аэробы или факультативные анаэробы. Дыхательная система устойчива к KCN. Хемоорганотрофы. Пигментов не образуют. Образуют гемолизин на кроличьем или лошадином кровяном агаре. Потребности роста сложные. Глюкозу сбраживают с образованием кислоты без газа. Нитраты, как правило, не восстанавливают. Каталазо- и оксидазоотрицательные. Желатин не разжижают. Оптимальная температура 37°С.
Паразиты млекопитающих.
Семейство Peptococcaceae
Клетки, варьирующие по величине (6,0-2,5 мкм). Встречаются поодиночке, парами, тетрадами, или неправильными массами, иногда - сарцины. Некоторые могут образовывать короткие или длинные цепочки с удлинением индивидуальных клеток. Неподвижны. Спор не образуют. Грамположительные (окраска может быть неоднозначной). Анаэробы. Хемоорганотрофы со сложными пищевыми потребностями. Углеводы, если сбраживают, то по типу гетероферментативного молочнокислого брожения. Могут образовывать сероводород.
Встречаются в ротовой полости, кишечнике и дыхательных путях человека и животных, часто в нормальном и патологическом мочеполовом тракте женщины.
Род Peptococcus
Сферические клетки 0,5-1,0 мкм в диаметре. Встречаются поодиночке, в парах, тетрадах, или в неправильных скоплениях, но не в форме сарцин. Неподвижны. Спор не образуют. Грамположительные. Анаэробы. Слабая или варьирующая каталазная реакция. Сахара не сбраживают или сбраживают слабо. Способны сбраживать аминокислоты. Образуют аммиак, иногда образуют индол. Коагулаза отсутствует. Редко гемолитические. Каталазоотрицательные. Индол не образуют. Нитраты не восстанавливают. Температурный оптимум 35-37°С. Оптимум рН 7,0-8,0. Чувствительны к пенициллину.
Выделены из мочеполовых путей женщин, пищеварительного тракта и дыхательных путей человека, при аппендиците, цистите, плеврите, из миндалин, плазмы крови, из кожи. Патогенность организмов сомнительна, т.к. их очень часто выделяли из мест, где имелись другие потенциальные патогены.
Род Peptostreptococcus
Клетки от сферических до овальных, обычно 0,7-1,2 мкм в диаметре. Встречаются в парах, тетрадах, коротких или длинных цепочках, неподвижные, спор не образуют. Грамположительные, анаэробы. Хемоорганотрофы. Слабо сбраживают углеводы с образованием кислоты или кислоты и газа. Они не сбраживают малат, цитрат, тартрат. Образуют аммиак, каталазоотрицательные. Нитраты не восстанавливают, индол не образуют, желатин не разжижают. Очень редко могут быть гемолитическими. Оптимум рН 7,0-7,5. Температурный оптимум 35-37°С. Требуют сложных сред. Обычно чувствительны к пенициллину. Выделены при гноеродных инфекциях, родовой горячке, из септических ран. Могут быть патогенными.
Род Ruminococcus
Сферические или удлиненные кокковидные клетки. Если клетки удлинены, то концы их вытянуты или плоские. Размеры клеток 0,3-1,5*0,7-1,8 мкм. Стороны клеток могут быть уплощены, когда они находятся в контакте с другими клетками. Располагаются поодиночке, в парах, в коротких или длинных цепочках. Могут быть подвижными за счет одного-трех жгутиков. Грамположительные, но относительно легко обесцвечиваются. Строгие анаэробы. Хемоорганотрофы. Сбраживают целлюллозу и целлобиозу, один или несколько моно- и дисахаридов с образованием кислот и газов. Пищевые потребности сложные. Аммиак незаменим в качестве главного источника азота. Каталазу, индол и сероводород не образуют. Реакция Фогес-Проскауэра варьирует. Небольшая часть штаммов разжижает желатин. Крахмал не гидролизуют и нитраты не восстанавливают. Оптимум температуры 30-37°С. рН около 6,5. Широко распространены в рубце жвачных животных и в толстом кишечнике травоядных, где играют важную роль в сбраживании целлюлозы.
Род Sarcina
Почти сферические клетки, 1,8-3,0 мкм в диаметре. В пакетах из 8 и более клеток. Обычно уплощены в местах контакта с другими клетками. Неподвижны. Спор не образуют. Грамположительные. Строгие анаэробы. Хемоорганотрофы. Сбраживают углеводы с образованием кислоты и газа. Каталаза отсутствует. Пигменты не образуют. Растут в пределах рН от 1 до 9,8. Широко распространены в окружающей среде.
Выделяются из кишечного тракта млекопитающих и с семян злаков.
biofile.ru
Анаэробные грамположительные кокки представлены двумя родами — Peptococous (состоит из единственного вида Р, niger) и Peptostreptococcus (P. assacchrolyticus, Р. magnus, Р. anaerobius, P. micros, P. tetradius, P. prevotii и другие, всего около 20 видов). Виды строгих анаэробных стрептококков, имеющие в настоящее время неоднозначное систематическое положение, встречаются редко.
Анаэробные грамположительные кокки входят в состав нормальной микрофлоры кожи, верхних дыхательных путей, желудочно-кишечного тракта, мочеполовых путей. Частота выделения этих микроорганизмов из влагалища при беременности резко возрастает и может превышать 90%. Грамположительные кокки отличаются низкой патогенностью, они практически лишены каких-либо значимых факторов вирулентности и во всех случаях являются условно-патогенными микроорганизмами.
Традиционно считается, что грамположительные анаэробные кокки наиболее актуальны для инфекционных процессов, локализующихся выше диафрагмы. Однако это положение справедливо только отчасти. Действительно, при инфекциях в области головы и шеи, хронических инфекциях верхних дыхательных путей (отиты, синуситы), периодонтитах, абсцессах мозга, легких и паратонзиллярных абсцессах грамположительные кокки встречаются чаще, чем при процессах другой локализации. В то же время клиническое значение видов Peptostreptococcus spp. и Р. niger четко показано при послеродовых гнойно-септических осложнениях и инфекционно-воспалительных заболеваниях органов малого таза у женщин. В последнем случае микроорганизмы чаще входят в состав смешанной микрофлоры. Все сказанное в определенной степени касается также интраабдоминальных инфекций.
Бактериемия, вызванная грамположительными кокками, встречается в основном при послеродовых инфекциях. Выделение микроорганизмов в чистой культуре из других образцов встречается крайне редко.
При оценке значимости выделения грамположительных кокков из стерильных локусов необходимо быть уверенным в отсутствии контаминации материала нормальной микрофлорой. При выделении из нестерильных локусов для подтверждения клинической значимости этих микроорганизмов необходимы серьезные аргументы.
Ерюхин И.А.
medbe.ru
В группу грамотрицательных анаэробных палочек, имеющих клиническое значение, включают следующие роды: Bacteroides spp., Prevotella spp., Porphyromonas spp., Fusobacterium spp. По морфологии они могут выглядеть как палочковидные или кокко-бациллярные формы. Таксономия анаэробных грамотрицательных палочек в последние годы претерпела значительные изменения. Пигментообразующие микроорганизмы выделены из рода Bacteroides и отнесены к родам Prevotella и Porphyromonas.
Грамотрицательные анаэробы являются компонентами нормальной микрофлоры человека. Некоторые из них встречаются преимущественно в дистальных отделах пищеварительное тракта (Bacteroides spp.), другие — в ротовой полости и верхних дыхательных путях (большинство из Prevotella spp., Porphyromonas spp.).
Несмотря на то, что микроорганизмы рода Bacteroides служат основным компонентом нормальной микрофлоры толстого кишечника, они обладают определенной патогенностью (продуцируют мегаллопротеазы и энтеротоксин) и в значительной части случаев (при правильном взятии биоматериала) могут рассматриваться как истинные возбудители инфекционных процессов. В умеренном количестве бактероиды встречаются также в половых путях у женщин. В редких случаях могут быть выделены из ротовой полости и верхних дыхательных путей.
В пределах рода Bacteroides выделяют микроорганизмы так называемой группы «Bacteroides fragilis». В этой группе В. fragilis и В. thetaiotaomicron являются наиболее частыми возбудителями интраабдоминальных инфекций и могут встречаться при инфекциях практически любой другой локализации. Не редкость выделение указанных микроорганизмов из крови и в большинстве случаев такие находки следует расценивать как клинически значимые. К группе В. fragilis относятся также более редкие бактерии: В. diatasonis, В. ovalus и некоторые другие. Бактероиды, не относящиеся к группе Bacteroides fragilis, таксономически не однородны и имеют меньшее клиническое значение.
Большинство представителей родов Prevotella, Porphyromonas и Fusobacterium вызывают инфекционные процессы, локализующиеся выше диафрагмы в ротовой полости, голове и шее, верхних и нижних дыхательных путях. Однако известны и многие исключения, например, Prevotella bivia и Prevotella disiens чаще выделяются при воспалительных заболеваниях малого таза у женщин.
Из грамотрицательных анаэробных кокков определенное клиническое значение могут иметь лишь микроорганизмы рода Veillonella., входящие в состав нормальной микрофлоры желудочно-кишечного тракта. Отдельные виды присутствуют в основном в фекальной флоре (V. parvula), другие — в полости рта и верхних дыхательных путях. Указанные микроорганизмы выделяются при инфекциях различной локализации, однако их клиническая значимость всегда спорна.
Ерюхин И.А.
medbe.ru
Обоснование темы. Кокки - обширная группа микроорганизмов, включающая патогенные, условно-патогенные и непатогенные шаровидные бактерии. Они чаще всего вызывают гноеродные процессы, особенно у новорожденных, детей раннего возраста, лиц с ослабленной иммунорезистентностью. Характер течения заболеваний, вызванных кокками, зависит и от биологических свойств микроба. Знание вопросов указанной темы необходимо для последующего обучения на кафедрах патологической физиологии, терапии, педиатрии, хирургии, нервных, глазных, кожно-венерических болезней, а также в будущей врачебной работе.
^ - сформировать представление о роли кокков в развитии патологических процессов у человека, о биологических свойствах микробов, их способности вызывать различные клинические формы заболеваний; научить основам микробиологической диагностики и интерпретации полученных результатов исследования.
^
-основные факторы иммунной защиты и неспецифической резистентности
-правила забора материала для исследований
-принципы микробиологической диагностики
^
-приготовить и окрасить мазки по Граму
-оценить культуральные свойства микробов на питательных средах
- правильно интерпретировать и оформить результаты исследований
^
^
1. Приготовить мазки из гноя, окрасить по Граму, промикроскопировать, зарисовать.
2. Описать культуральные свойства стафилококков в готовых посевах на жидких и плотных питательных средах.
4. Изучить признаки патогенности стафилококков: плазмокоагулазную, лецитоветилазную, гемолитическую активность, способность утилизировать маннит в аэробных и анаэробных условиях.
5. Определить чувствительность стафилококков к антибиотикам.
6. Определить фагогруппу стафилококков.
7. Промикроскопировать готовые мазки со стрептококками.
8. Изучить характер роста стрептококков на КМПА, сахарном бульоне.
9. Изучить биопрепараты, применяемые для диагностики, профилактики и лечения заболеваний, вызванных стафилококками и стрептококками.
10. Составить алгоритм диагностики стафилококковых и стрептококковых инфекций.
11. Решить предложенные ситуационные задачи.
^
Материалом для исследований может быть раневое отделяемое, кровь, спинномозговая жидкость, рвотные массы и промывные воды желудка, пунктаты из ограниченных очагов воспаления, мокрота, слизь из зева и т.д.
Чаще всего материал забирают ватным тампоном, который помещают в пробирку с транспортной питательной средой для контроля стерильности (СКС).Кровь засевают в питательную среду на основе СКС в соотношении 1:10 - 1:20. Пробы из ограниченных очагов воспаления забирают шприцем, а рвотные массы и промывные воды помещают в стерильные флаконы с притертыми пробками. Материал доставляют в бактериологическую лабораторию не позднее двух часов с момента забора.
^
Из гноя и осадка, полученного центрифугированием, готовят мазки на предметных стеклах и окрашивают их по Граму. При обнаружении в мазках грамположительных кокков диаметром 0,5 - 1,5, располагающихся поодиночке, парами, короткими цепочками или в виде гроздевидных скоплений, можно предположить наличие в исследуемом материале стафилококков. Расположение микробов вмазке зависит от материала, из которого приготовлен препарат. Типичные гроздевидные скопления можно увидеть в мазках, приготовленных из 1 - 2 суточной агаровой культуры. Мазки, приготовленные с бульонной культуры, обычно представлены одиночными или парными кокками. В материале из гноя встречаются одиночные кокки, которые могут располагаться в фагоцитах. В гистологических срезах обнаруживаются большие скопления в виде микроколоний. Под действием антибиотиков, различных химических соединений, при культивировании на некачественных средах образуются формы изменчивости - большие шары или мелкие д-формы.
^ (проводится в три этапа)
В качестве среды накопления используют бульон с 6,5% NaCl, разлитый в пробирки по 5 мл, в который вносят по 0,5 мл смывной жидкости.
Первичный посев материала для выделения чистой культуры производят на селективные среды: ЖСА (желточно-солевой агар), МЖСА (молочно-желточно-солевой агар). Можно использовать для выделения чистой культуры КМПА (кровяной агар).
Среды с исследуемым материалом помещают в термостат (температура 37°С ) на 18-24 часа. Для лучшего выявления пигмента чашки с ЖСА, МЖСА, КМПА дополнительно выдерживают на свету при комнатной температуре еще 24 часа.
Второй этап - изучение культуральных свойств.
На КМПА стафилококки образуют непрозрачные колонии белого или золотистого цвета, гладкие, блестящие, с ровными краями , диаметром 1-3 мм с зоной полного гемолиза или без нее. При наличии лецитоветилазной активности у стафилококков на ЖСА вырастают колонии, окруженные радужным венчиком, который особенно хорошо виден при косом освещении.
Из части выросших типичных для стафилококков колоний готовят мазки на стекле, окрашивают по Граму и микроскопируют. При наличии в мазке грамположительных кокков, оставшуюся часть колонии пересевают на скошенный МПА для накопления чистой культуры и помещают в термостат в прежнем режиме на 24 часа.
Третий этап - видовая идентификация стафилококков.
Видовая идентификация стафилококков проводится на основании комплекса биологических свойств выделенной чистой культуры. Для дифференциации стафилококков от стрептококков определяют каталазную активность. Для постановки этого теста изучаемую чистую культуру помещают с помощью стеклянной палочки в каплю 3-10% раствора перекиси водорода на предметном стекле и растирают круговыми движениями, выделение пузырьков свидетельствует о присутствии стафилококков.
Стрептококки каталазной активностью не обладают.
Реакция плазмокоагуляции .Петлю суточной агаровой культуры стафилококка
суспензируют в 0,5 мл цитратной кроличьей плазмы, разведенной 1:5. Результаты реакции
регистрируют через 1, 2, 4, и 18 часа инкубации пробирок в термостате при температуре
37°С. Появление в пробирке студнеобразного сгустка свидетельствует о плазмокоагулазной активности изучаемого штамма.
Определение ДНК- азы. Суточную агаровую культуру стафилококка засевают короткими штрихами на поверхность МПА, содержащего ДНК. После инкубации посевов при 37°С в течение 18 -24 ч поверхность агара заливают 1 N раствором соляной кислоты. Вокруг колоний, продуцирующих ДНК- азу, образуется зона просветления.
Определение фосфатазы. Изучаемую культуру засевают бляшками на чашку с
фенолфталеиновым агаром и помещают в термостат (37°С ) на 18 - 24 часа, после чего
выросшие колонии обрабатывают парами аммиака. Розовое окрашивание колоний
свидетельствует о фосфатазной активности стафилококка.
Ферментация углеводов и мочевины изучают на питательных средах содержащих 1% соответствующего субстрата и индикатор.
Определение ацетоина. Чистую культуру стафилококка засевают в бульон Кларка, помещают в термостат 37°С на 18 - 24 часа. После инкубации в пробирки с культурой
добавляют небольшое количество 5% спиртового раствора альфа нафтола и 40% NaOH. Результат учитывают после повторного пребывания в термостате в течение часа. При выделении ацетоина среда окрашивается в красный цвет.
Для ускоренной биохимической идентификации стафилококков можно применить микрометод, в котором используют жидкие дифференциально-диагностические среды в полистироловых планшетах. В последние годы широкое распространение получил электрофоретический метод внутривидового типирования стафилококков по спектрам образуемых ими внеклеточных белков. Для определения экзотоксинов стафилококков разработаны иммуноферментные тест - системы, обладающие высокой чувствительностью и специфичностью.
Для установления источника госпитальной инфекции выделяют чистые культуры стафилококка от больных и бактерионосителей, после чего проводят их фаготипирование с помощью набора типовых стафилофагов, устанавливая идентичность фаготипов. Каждую из исследуемых культур засевают сплошным газоном на МПА в чашки Петри, подсушивают, а затем петлей нанося по капле каждого фага на квадраты соответственно количеству фагов диагностического набора. (Разметка квадратов проводится на дне чашке предварительно). Посевы инкубируют при 37°С, результаты оценивают на следующий день по наличию лизиса культуры в квадратах. В завершение исследования определяется чувствительность стафилококка к антибиотикам.
Таблица 1.
^
Виды стафилококков | Признак патогенности | ||||||||||
ДНК-аза | Плазмо-коагулаза | Фосфо-таза | Нитрат редуктаза | Уре -аза | Ге- молиз | ^ | Продук-ция ацетоина | ||||
Ман -ноза | Мальтоза | Ман -нит | Саха -роза | ||||||||
S. aureus | + | + | + | + | d | + | + | + | + | + | + |
S. epidermidis | - | - | + | + | + | (+) | (+) | + | - | + | + |
S. saprophythicus | - | - | - | - | + | - | - | + | d | + | + |
S. intermedius | + | + | + | + | + | d | (+) | (+) | d | + | - |
S. schleiferi | + | - | + | + | - | (+ ) | + | - | - | - | + |
S. capitis | - | - | - | d | - | (d) | + | - | + | (+) | d |
S. wameri | - | - | - | d | + | (d) | - | (+) | d | + | + |
S. haemolyticus | - | - | - | + | - | (+) | - | + | D | + | + |
S. hominis | - | - | - | d | + | - | - | + | - | (+) | d |
S. liqdunensis | - | - | - | + | d | (+) | + | + | - | + | + |
S. cohnii | - | - | - | - | - | (d) | (d) | (d) | d | - | d |
S. xylosis | - | - | d | d | + | - | + | + | + | + | d |
Обозначения: + 90% положительных и более штаммов;
- 90% и более отрицательных штаммов;
d – 11-89% позитивных; ( ) – замедленная реакция
medznate.ru
Мазок – рутинно применяемый метод исследования бактериального и клеточного состава слизистых, используемый при профилактических обследованиях при подозрении на различные заболевания. Расшифровка анализа позволяет выявить специфические заболевания репродуктивной системы у женщин и мужчин (гонококковую инфекцию, трихомониаз, гарднереллез, вагиноз). Так же позволяет выявить носителей патогенного стафилококка и даже менингококка. Метод прост, информативен, не требует специальной подготовки, применим так же у детей, обязателен при беременности.
В зависимости от необходимости мазки берут:
Главными целями микроскопии посева из полостей носа и глотки – расшифровка бактериального состава и выявление патогенного стафилокка (например, при гнойных заболеваниях), менингококка (диагностика, профилактика менингита), диагностика кандидоза (выявление грибов). Нормальная кокковая микрофлора полости носа и рта представлена: грамотрицательные диплококки – палочки Neisseria influenza, грамположительные кокки — эпидермальный стафилококк. Эти микробы являются обычными «жителями» кожных покровов и слизистых, в норме заболеваний не вызывают. Патологическая кокковая флора в мазке представлена золотистым стафилококком (Staphylococcus aureus), менингококком (Neisseria meningitis).
Золотистый стафилококк – назван за характерный вид при образовании колоний. Основная причина внутрибольничной инфекции. При профилактическом осмотре исследование показывает, что до 35% пациентов являются носителями этого вида бактерий. До 70% случаев заболеваний, сопряженных с гнойно-воспалительными изменениями, выявляют Staphylococcus aureus: кожные гнойные инфекции (импетиго, угри, фурункулез), абсцессы, флегмоны, гнойные артриты, эндокардит, пневмония, остеомиелит, менингит. Стафилококковый сепсис (заражение крови) имеет характерные особенности и часто приводит к фатальным последствиям. Если в анализе выявлен микроорганизм, то это значит, что человек предрасположен к вышеперечисленным заболеваниям. Лечение проводится курсом антибиотиков, обязательно контрольное исследование.
Менингококк – возбудитель менингита (воспаление мозговых оболочек), менингококкового сепсиса и назофарингита (воспаление полостей носа и глотки). Первые два заболевания очень опасны, связаны с высоким риском летального исхода. Вне организма человека менингококк быстро погибает. При микроскопии менингококк выглядит как сдвоенные клетки по форме напоминающий кофейные зерна, расположенные попарно вогнутой поверхностью друг к другу. Менингококк передается воздушно-капельным путем. Случаи, когда менингококк асимптомно присутствует в микрофлоре зева нередки, носитель при этом помимо риска прогрессирования инфекции у себя распространяет менингококк среди здоровых людей. Если в посеве обнаружен менингококк, то это значит, что Вам необходимо обратиться к врачу для назначения курса антибиотикотерапии. Лечить самостоятельно крайне нежелательно!
При микроскопии мазка у женщин можно определить степень бактериальной «чистоты», признаки венерических заболеваний, кандидоза. Нормальная микрофлора представлена в основном лактобактериями (грамположительные палочки) и бифидобактериями (суммарно 90-96%) — вырабатывая молочную кислоту они «закисляют» среду, препятствуя заселению патогенной флоры. Грамположительные эпидермальный стафилококк, пептострептококки, пропионобактерии, клостридии и грамотрицательные бактериоиды и превотеллы в значительно меньшем количестве выявляются при исследовании.
У мужчин так же возможно проверить наличие или отсутствие венерических заболеваний, простатита. Микробиоценоз уретры мужчин состоит в основном из эпидермального стафилококка, реже встречается коринебактерии и зеленящий стрептококк.
Роль эпидермального стафилококка состоит в вытеснении патогенной флоры продуктами жизнедеятельности. Условно патогенные микроорганизмы (протей, кишечная палочка, анаэробы, золотистый стафилококк) попадают в уретру обычно с кожных покровов и из кишечного тракта. Патологическими представителями микромира в урогенитальной сфере женщин и мужчин являются грамотрицательные диплококки (Neisseria gonorrhaeae).
Гонококк (Neisseria gonorrhaeae) – возбудитель венерического заболевания – гонореи. При окраске – грамотрицательный, выглядит как сдвоенный кокк (отсюда название диплококки). Передача гонореи происходит половым путем, возможен бытовой и вертикальный пути (от матери к ребенку). Диплококки плохо устойчивы во внешней среде. Основные симптомы у женщин обычно не выражены, однако нередко отмечаются выделения из влагалища, боли при мочеиспускании, боли в промежности, зуд, жжение.
Мужчины отмечают появление выделений из уретры, боль при мочеиспускании по ходу мочевого канала. Такое сочетание жалоб нередко и подталкивает выполнить тест. Мазок на гонококк не требует сложной подготовки: женщинами он выполняется в межменструальный период, для мужчин достаточно не мочится 3 часа перед тестом. Посев и расшифровка под микроскопом колоний выявляет типичные диплококки.
Точность диагностики при сдаче анализа на гонококки высокая. Лечение достаточно простое – курс антибиотикотерапии лекарством, выводящимся с мочой. После излечения гонореи (проводить обязательно под контролем врача!!!) через месяц назначается повторный контрольный мазок. Настойчиво рекомендуется выполнить исследование у полового партнера.
При отсутствии осложнений, гинекологический мазок при беременности берут при постановке на учет, на 30 неделе и перед родами. Целью является раннее выявление и коррекция изменений степени «чистоты» влагалища, исключение (подтверждение) наличия венерических заболеваний.
Различают 4 степени чистоты влагалища (используется не только при беременности, шкала применима у всех женщин). Расшифровка микроскопии и что значит исследование:
Кокковая флора зачастую является представителем нормальной флоры различных поверхностей организма. Выявление патологических представителей кокков – золотистого стафилококка, менингококка, гонококка означает, что требуется лечение под контролем врача. Выполнение мазка при беременности — важный диагностический тест для сохранения репродуктивного здоровья женщин.
proanalizy.com
Рифамицин бактериостатический и бактерицидный антибиотик, эффективный против грамположительных кокков, особенно против стафилококков и пневмококков, а также губительно действует на гонококки, менингококки и туберкулезную палочку. [c.157]
Грамположительные кокки Грамотрицательные бациллы [c.94]
Ветчина, кленовый сироп Грамположительные кокки [c.87]
Пресс Френча эффективен при разрушении грамотрицательных и некоторых грамположительных бактерий (особенно бацилл). Эндоспоры и грамположительные кокки в нем не разрушаются, для этих устойчивых клеток более действенно баллистическое разрушение или обработка лизоцимом. [c.142]Разрушение клеток в замороженном виде с помощью пресса Хьюза — один из наиболее эффективных способов разрушения клеточного материала разного происхождения ог бактериофагов до животных тканей. С его помощью можно разрушать клетки бактерий, обычно трудно поддающиеся разрушению (например, грамположительных кокков). [c.385]
В общем наиболее распространенные физические методы разрушения клеток можно классифицировать следующим образом в порядке уменьшения их дезинтегрирующего действия пресс Хьюза > вибрационные мельницы>пресс Френча>ультразвук>растирание с окисью алюминия. По устойчивости к разрушению клетки различных микроорганизмов можно расположить в последовательности (в порядке уменьшения) дрожжи> >мицелий грибов>грамположительные кокки>грамположительные палочки>грамотрицательные палочки >галобактерии>-микоплазмы. [c.385]
Бактериоскопическое исследование (схема 2). Из исследуемого материала (за исключением крови) готовят мазки для первичной бактериоскопии, окрашивают по Граму и микроскопируют. Наличие в препаратах грамположительных кокков, располагающихся в виде скоплений, напоминающих виноградные гроздья (рис. 62), позволяет поставить предварительный диагноз стафилококковой инфекции. [c.134]
Бактериоскопическое исследование (схема 21). Из исследуемого материала готовят мазки и окрашивают по Граму. В положительном случае обнаруживают кокки. Дифференцирование стафилококков, стрептококков и гонококков проводится на основании взаимного расположения клеток, локализации их внутри или вне лейкоцитов, окраски по Граму. Стафилококки и стрептококки являются грамположительными кокками, которые располагаются, как правило, вне лейкоцитов. Гонококки — грамотрицательные диплококки бобовидной формы (0,96—1 мкм), располагающиеся внутри лейкоцитов (рис. 83). Положительный бактериоскопический диагноз ставится в основном при острой форме гонореи до применения антибиотиков. При хронической гонорее бактериоскопическое исследование часто дает отрицательный результат. [c.222]
Из бульонной культуры выделенного микроба и из колоний с признаками, характерными для пневмококка, делают мазки, окрашивают их по Граму и микроскопируют. При наличии пневмококка в мазках обнаруживаются грамположительные кокки, расположенные парами или в виде цепочек наподобие стрептококка. Расположение в виде цепочек особенно характерно для сывороточно-бульонной культуры. [c.191]
В современном арсенале фармацевтических препаратов важное место принадлежит производным хинолона и фторхинолона. Антимикробный спектр производных хинолона включает подавляющее большинство энтеробактерий. Многое из этих соединений проявляют активность в отношении грамположительных кокков и стрептококков. Препараты на их основе эффективны против анаэробов и при лечении системных инфекций. Следовательно, путь поиска новых активных препаратов в данном ряду соединений является перспективным. Максимальный эффект таких исследований может быть достигнут с применением вычислительных схем, позволяющих установить связь между молекулярной структурой соединений и их активностью. [c.5]
Группа 12. Грамположительные кокки. В состав группы входят представители 15 родов, значительно различаюшихся филогенетически и фенотипически. Это облигатные аэробы, анаэробы или факультативные формы. Энергию получают за счет дыхания и/ или брожения. Хемоорганогетеротрофы с различными потребностями в питательных веществах. [c.172]
На 2-й день изучают выросшие колонии стафилококки образуют выпуклые, ровные непрозрачные колонии средней величины белого, лимонно-желтого или золотистого цвета (гемолитические или негемолитические). Пигментообразование лучше заметно на молочно-солевом агаре. На желточно-солевом агаре большая часть патогенных стафилококков вызывает лецитиназную (ле-цитовителлазную) реакцию, проявляющуюся в образовании вокруг колонии зоны помутнения с радужным венчиком в отраженном свете. При микроскопии в мазках обнаруживают грамположительные кокки, расположенные гроздьями. [c.105]
Заметим, что из культуральной жидкости после роста Str. la tis выделен полипептидный антибиотик низин, состоящий из пяти самостоятельных полипептидов. Низин активен против грамположительных кокков и туберкулезной палочки чаще используется как консервант в пищевой промышленности [22]. [c.141]
К семейству молочнокислых бактерий относительно близко примыкают группы фекальных и пиогенных стрептококков, представляющих интерес для медицинской микробиологии. Это грамположительные кокки (особенно в молодых культурах), в коротких или длинных цепочках, неподвижные, бесспоровые, микроаэрофилы или факультативные анаэробы, не продуцирующие каталазы, относительно плеоморфны. Отдельные штаммы и виды их активно образуют гиалуронидазу, что может быть использовано в практических целях. На пластинках мясного агара с 5 % крови млекопитающих стрептококки подразделяются по гемолитической активности на а-, р- и у-типы. Из них первые трансформируют гемоглобин в метгемоглобин, следствием чего появляется зеленоватая окраска вокруг колоний на пластинке, вторые гемолизи-руют кровь, т. е. просветляют агар вокруг колоний за счет действия О- и S-стрептолизинов, третьи не изменяют эритроциты (индиф- [c.146]
Если гидроксил в позиции С7 заменить на хлор, то получается полусинтетический антибиотик клиндамицин, лучше линкомицина всасывающийся в кровь из кишечника. Линкомицин и клиндамицин проявляют активность преимущественно против грамположительных кокков. Механизм их противобактериального действия в основном связан с нарушением синтеза белка. [c.169]
Клиндамицин лучше всасывается в кровь из кишечника. Оба антибиотика активны преимущественно против грамположительных кокков. [c.438]
Стафилококки, объединяемые в род Staphylo o us, по ряду признаков легко отличимы от сходных с ними микрококков и стрептококков. Это — грамположительные кокки, имеющие правильную шаровидную форму, обладающие активной каталазой, ферментирующие глюкозу в анаэробных условиях с выделением кислоты, как правило , образующие пигмент па питательных средах. Два вида стафилококков имеют различное санитарное и эпидемическое значение. Staph, aureus — потенциально патогенный вид, отличительными признаками которого являются способность коагулировать плазму крови, ферментировать маннит в анаэробных условиях и ряд других свойств. [c.50]
В качестве экспрессного теста для быстрого, за 1—5 мин, отделения псевдомонад, аэромопад, вибрионов от бактерий семейства Euteгoba teriaef ae рекомендовано определение оксидазной активности бакгерий. Такой же экспрессный тест определения каталазной активности применяют при исследовании па наличие энтерококков. Тест позволяет в течение минуты отделить энтерококки от прочих грамположительных кокков, которые обладают активной каталазой. [c.68]
У ряда бактерий биосинтез лизина протекает через а-е-дн-аминопимелиновую кислоту. По данным Уорк и ее сотрудников, а также других авторов [1028—1033] (стр. 51), мезо- и LL-формы а, е-диаминопимелиновой кислоты щироко распространены у самых различных бактерий у некоторых бактерий, например у грамположительных кокков, у водорослей, грибов и дрожжей эта аминокислота не найдена. Диаминопимелиновая кислота, по-видимому, является предшественником лизина на это указывает ее превращение в лизин под действием специфической декарбоксилазы (стр. 209). Это предположение подтверждается также данными Дэвиса [1034], выделившего му- [c.428]
Устин образуется Aspergillus ustus - . Молекула этого антибиотика содержит кроме углерода, водорода и кислорода еще и хлор. Составу устина отвечает суммарная формула С Н О СЬ,. При перекристаллизации из толуола, уксусной кислоты, эфира, смеси эфира с гексаном это вещество получается в виде квадратных пластинок с т. пл. 185—187°. Вещество легко растворимо в этиловом спирте, ацетоне, эфире, бензоле и практически нерастворимо в воде. Устин подавляет грамположительные кокки и некоторые микобактерии, например My oba terium гапае, полностью при разбавлении 1 300 ООО, частично при разбавлении 1 1 500 ООО. При понижении значения pH среды активность устина возрастает, но она сильно снижается сывороточным альбумином и некоторыми другими веществами. [c.213]
Это мелкие грамположительные кокки. В мазках располагаются скоплениями, часто гроздевидными. Спор не образуют, неподвижны. Образуют микрокансулы. Являются факультативными анаэробами. [c.91]
Относятся к семейству Strepto o a eae, роду Sirepto o us. Это грамположительные кокки, в мазках располагаются цепочками или попарно. Являются факультативными анаэробами. Не растут на питательных средах. На кровяном агаре дают мелкоточечные беспигментные колонии, окруженные зоной гемолиза а — зеленящий, /3 — прозрачный. Заболевание чаще вызывается /3-гемолитическим стрептококком. В сахарном бульоне дают придонно-пристеночный рост, а сам бульон остается прозрачным. Растут при температуре 37 °С. Стрептококки способны расщеплять аминокислоты, белки, углеводы. По биохимическим свойствам выделяют 21 вид. Большинство из них условно-патогенные. [c.93]
Соответствует ли метод разрушения клеток типу исследуемого организма Единой методики, которая давала бы хорошие результаты для всех типов бактерий, не существует. Например, один из возможных методов разрушения большинства грамотрицательных бактерий— продавливание клеток в прессе Френча — не очень эффективен по отношению к грамположительным коккам. Во встряхивающем гомогенизаторе Брауна полностью разрушаются клетки грамположительных кокков (Braun MSK shaker) и значительно повреждаются клетки грамотрицательных бактерий. [c.138]
При добавлении в агаровую среду (разд. 8.5.40) фе-нилэтанола в концентрации 0,25% подавляется рост грамотрицательных бактерий, главным образом Proteus, тогда как на грамположительные кокки фенилэтанол не действует. Эга среда пригодна, например, для выделения из проб кала коагулазоположительных стафилококков. [c.299]
Бактериоскопическое исследование (схема 3). Мазки для первичной бактериоскопии готовят из патологического материала, окрашивают по Граму и микроскошфуют. При положительном результате обнаруживают грамположительные кокки, располагающиеся в виде цепочек (см. рис. 62). [c.137]
Второй день. 1. Просматривают посевы. При этом рекомендуется пользоваться бинокулярной стереоскопической лупой (МБС-1 или МБС-3). На поверхности сывороточного агара, кроме бактерий рода нейссерий, наблюдается обильный рост многочисленных грамположительных кокков, вегетирующих на слизистой оболочке зева. [c.196]
Аминогликозиды — бактерицидные антибиотики широкого спектра действия. Наибольшую практическую значимость имеет их высокая активность в отношении большинства грамотрицательных бактерий (кишечной палочки, сальмонелл, шигелл, протея, клебсиелл, энтеро-бактеров, серраций) и стафилококков (в том числе метициллинрезистентных). Аминогликозиды третьего поколения активны в отношении синегнойной палочки, стрептомицин и канамицин — микобактерий туберкулёза. Из грамположительных кокков умеренно чувствительны стрептококки (в том числе энтерококки) и пневмококки, из грамотрицательных — гонококки и менингококки. Анаэробая микрофлора и большая часть грамположительной микрофлоры устойчивы к аминогликозидам. [c.347]
chem21.info
об обновлениях на сайте по Email БЕСПЛАТНО! Как только на сайте появятся новые посты, видео или фото, Ты сразу же будешь извещен об этом одним из первых.
Нет сообщений для показа